لم تلبث تونس كثيرا تحت يد العثمانيين حتى اتفق شارلكان وأسبان برشلونة ورهبان مالطة على الحرب واستعادة تونس التي كانت تحت يد الأسبان قبل أن يستعيدها خير الدين العام الماضي، مستغلين انشغال العثمانيين بحرهم ضد الصفويين الرافضة، فتوجه الجيش بقيادة شارلكان نفسه ملك أسبانيا بحملة بحرية كبيرة تكونت من ثلاثين ألف مقاتل أسباني وهولندي وألماني ونابولي وصقلي، على ظهر خمسمائة سفينة، وركب الأمبراطور البحر من ميناء برشلونة وعندما رست سفنه أمام تونس قامت المعارك العنيفة بين الطرفين، لم تكن قوة خير الدين بكافية للرد على ذلك الهجوم، فكان الجيش الإسلامي تعداده سبعة آلاف جندي عثماني وصلوا مع خير الدين ونحو خمسة آلاف تونسي، كما تخلف الأعراب عن الجهاد فكانت النتيجة الحتمية أن استولى شارل على معقل حلق الوادي مرسى تونس، ونصب الأسبان الحسن بن محمد حاكماً عليها، وعملاً بمنطوق المعاهدة كان الحسن بن محمد سيسلم بونه والمهدية إلى شارل الخامس، فاستولى على بونة، وبما أن المهدية كانت في حوزة العثمانيين، فإن الحسن لم يستطع الوفاء بعهده فاشترط الأسبان عليه أن يكون حليفاً ومساعداً لفرسان القديس يوحنا بطرابلس وأن يقوم بمعاداة العثمانيين وأن يتحمل نفقات ألفي أسباني على الأقل يتركون كحامية في قلعة حلق الواد وعاد شارل الخامس إلى أسبانيا بعد أن ارتكبوا أفظع الجرائم في تونس عند دخولهم فيها مظهرين الحقد الدفين فجعلوا جامع الزيتونة اسطبلا لخيولهم وأحرقوا المساجد والكتب النادرة فيها، غير قتلهم النساء والأطفال.
(تنبيه): التاريخ الميلادي تقريبي نظراً لاشتماله على أكثر من عام هجري أحياناً